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BIOBASIC液相色譜柱峰拖尾原因

更新時間:2016-08-24      瀏覽次數(shù):2598
  
  
  A)BIOBASIC液相色譜柱污染
  
  如果色譜柱開始使用時峰形正常,使用一段時間后逐漸出現(xiàn)峰拖尾,則色譜柱被污染的可能性很大,這時需要對色譜柱加強(qiáng)沖洗,即使用比方法流動相更強(qiáng)的溶劑沖洗色譜柱。BIOBASIC液相色譜柱還可以反沖,反沖的沖洗效率比正著沖要更高。
  
  建議做好樣品前處理,但如果前處理后依然比較臟,強(qiáng)烈建議配置保護(hù)柱。一旦峰形變差,柱效下降,應(yīng)及時更換保護(hù)柱芯。
  
  B)柱外死體積
  
  較大的柱外死體積會導(dǎo)致峰形擴(kuò)展和峰拖尾,建議仔細(xì)檢查樣品經(jīng)過的所有管路及各連接部位,請使用合適的管線和接頭。
  
  C)樣品過載
  
  D)樣品溶劑過強(qiáng)
  
  樣品溶劑的強(qiáng)度應(yīng)不高于流動相的洗脫強(qiáng)度。使用流動相溶解樣品或使用比初始比例流動相洗脫能力更弱的溶劑來溶解樣品。
  
  E)組分共流出
  
  如果一小峰包含在一大峰后面,這一共流出的峰會顯現(xiàn)為拖尾峰。需要做好色譜條件的優(yōu)化,有條件時可利用DAD檢查峰純度。
  
  F)流動相的pH在樣品pKa附近
  
  流動相的pH在樣品的pKa附近時,樣品解離平衡不充分,容易出現(xiàn)前伸峰或拖尾峰。所以流動相的pH應(yīng)盡量選在樣品pKa±1.5以外
  
  G)BIOBASIC液相色譜柱填料表面的惰性不夠好
  
  鍵合硅膠型填料表面的殘留硅羥基或金屬雜質(zhì)易與待測化合物發(fā)生二次作用而導(dǎo)致拖尾。
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